蛋白組學(xué)和蛋白質(zhì)化學(xué)
隨著生物制藥產(chǎn)品在市場上的快速增長，對蛋白質(zhì)組學(xué)研究中更快速、更有效的結(jié)構(gòu)闡明方法的需求越來越大。在這個工作流程中有一個小而關(guān)鍵的步驟，那就是二硫鍵的還原。傳統(tǒng)的方法是使用化學(xué)方法來實現(xiàn)這一點。Antec開發(fā)了用于自動在線二硫化物鍵還原的ROXY反應(yīng)器。
該方法是基于一個電勢來觸發(fā)還原反應(yīng)，不使用還原性化學(xué)品。傳統(tǒng)上，還原是使用化學(xué)品進行的，例如二硫蘇糖醇(DTT)，需要在LC/MS分析之前去除。此外，也可以使用無硫醇還原劑，如TCEP(三(2-羧乙基)膦)?；瘜W(xué)法樣品制備是費力的，很難與在線LC/MS相結(jié)合。用質(zhì)譜在線設(shè)置的電化學(xué)是干凈的，不需要化學(xué)品，結(jié)果可以即時監(jiān)測。
蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)闡明
EC/MS的另一個應(yīng)用領(lǐng)域是快速發(fā)展的生物制藥研究領(lǐng)域。生物制藥是利用生物技術(shù)在生命系統(tǒng)中生產(chǎn)的藥物。它們是復(fù)雜的、高分子量的蛋白質(zhì)，如融合蛋白、生物親和蛋白、抗體(mAbs)和抗體-藥物偶聯(lián)物(adc)。
隨著越來越多的生物藥物出現(xiàn)在市場上，對高效和自動化的結(jié)構(gòu)闡明策略的需求日益增長。這可能是一個相當(dāng)大的挑戰(zhàn)。不僅僅是初級結(jié)構(gòu)，氨基酸的定位是重要的。它還涉及由內(nèi)部二硫鍵和翻譯后修飾(如磷酸化、乙?；吞腔?所定義的高級結(jié)構(gòu)(HOS)。結(jié)構(gòu)是生物活性的定義(綜述:D. Virág等，2020)。
蛋白質(zhì)中的二硫鍵具有穩(wěn)定性和可折疊性，因此對蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能至關(guān)重要。例如，在單克隆抗體中，二硫鍵將小而重的鏈連接在一起。因此，在蛋白質(zhì)治療中驗證二硫化物的位置和連通性是很重要的。這通常是通過還原二硫鍵和分析質(zhì)譜的變化來實現(xiàn)的(綜述:J. Lakudb等人，2018)。
電化學(xué)還原可以通過在與ms連接的在線設(shè)置中使用EC反應(yīng)器自動化這樣的工作流程。這是生物制藥結(jié)構(gòu)闡明挑戰(zhàn)中的一小步，但具有重要意義(C. Cramer at al, 2015)。
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https://antecscientific.com/solutions/applications/disulfide-bond-reduction/
